1879年3月10日，出生于马来西亚槟城，字联星。祖籍广东广州府新宁县（今广东台山市）。毕业于剑桥大学。著名医学家、公共卫生学家。父亲伍祺学，母亲林彩繁。妻子黄淑琼、李淑贞。儿子伍长庚、伍长福、伍长明、伍玉玲、伍玉珍、伍长生、伍长员。伍连德故居位于北京东堂子胡同4号、6号。 7岁，考入英国人设立的槟榔屿公学。1896年，考取英国女皇奖学金，留学英国剑桥大学意曼纽学院学医。1899年6月，获得剑桥大学文学学士学位，并考取圣玛丽医院奖学金，入该院听课和实习三年。1903年，获得剑桥大学博士学位，此后，到吉隆坡医学研究院从事了一年的疟疾和脚气病的研究工作。1904年，回到槟榔屿，在珠烈街开设私人诊所。1907年，回国任天津陆军军医学堂副监督（副校长职），不久被派赴伦敦、柏林考察军事医学。1910年12月，东北发生鼠疫大流行，清政府任命伍连德为东三省防鼠疫全权总医官，成功扑灭东北鼠疫。1911年4月，出席在奉天（今沈阳）召开的万国鼠疫研究会议，与各国专家共同完成《1911年国际鼠疫研究会会议报告书》。1912年，在哈尔滨筹建东三省防疫事务总管理处及附属医院。1915年，建立中华医学会，任书记并兼任《中华医学杂志》总编辑。1916年，任黎元洪总统特医及京汉、京张、京奉、津浦四条铁路总医官。1918年，任北洋政府中央防疫处处长、北京中央医院（今位于白塔寺的北京医科大学人民医院分院）院长。1920年，在美国约翰·霍普金斯大学进修学校卫生和公共卫生。1922年，在沈阳创建东北陆军医院。1926年，创办哈尔滨医学专门学校（哈尔滨医科大学前身），任第一任校长。1927年，国际联盟卫生处聘伍连德为该处中国委员，并授予鼠疫专家称号。1930年，任上海全国海港检疫管理处处长、技监，兼任上海海港检疫所所长。1935年，获诺贝尔生理学或医学奖候选人。八一三事变后，举家重返马来西亚，定居怡保市，开设私人诊所。1960年1月21日，在马来西亚的槟榔屿逝世。